酵母双杂交技术筛选细胞极化蛋白PALS1的结合蛋白

• 作者: 刘晓颖 张庆慧 戴寒晶 范礼斌 高雪敏
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 酵母菌 双杂交系统技术
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 154-157
• 页数: 4页
• 分类号: R341.3
• 字数: 2892字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2007.02.010

摘要

目的 筛选细胞极化蛋白PALS1的结合蛋白,进一步探讨PALS1的功能及其分子机制.方法 将PALS1的全长cDNA序列克隆到载体pGBKT7中,重组的pGBKT7-PALS1质粒转入酵母AH 109细胞,细胞置于SD/-Trp培养基上生长,阳性细胞再用Hela细胞的cDNA文库质粒转化,生长于SD/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal,显蓝色的克隆为阳性.阳性克隆细胞中的DNA被抽提后转化细菌细胞,然后抽提DNA进行酶切分型.合适的类型测序后进行BLAST检索分析.结果 筛选到了13个阳性克隆,其中有2个是已知蛋白的基因即ATRAP和GLT28D1.结论 利用酵母双杂交系统成功克隆了PALS1的结合蛋白的基因,为进一步研究PALS1蛋白的功能提供了有益的启示.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范礼斌	安徽医科大学基础医学院生物学教研室	53	174	8.0	9.0
2	刘晓颖	安徽医科大学基础医学院生物学教研室	57	121	6.0	8.0
3	高雪敏	安徽医科大学基础医学院生物学教研室	1	0	0.0	0.0
4	张庆慧	安徽医科大学基础医学院生物学教研室	2	0	0.0	0.0
5	戴寒晶	安徽医科大学基础医学院生物学教研室	3	16	2.0	3.0