补料分批培养大肠杆菌表达胸腺素α1融合蛋白

• 作者: 丁洁 包永明 段涛 白凤武 程波 谢健
• 来源期刊: 武汉工程大学学报
• 学科: 工学
• 关键词: 基因工程菌 分批补料 胸腺素α1融合蛋白
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: TQ920.1|Q786
• 字数: 4386字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-2869.2007.03.007

摘要

在摇瓶培养含有trymosin α1基因的重组pET32a质粒的工程菌BL21表达胸腺素α1融合蛋白的基础上,确定了分批发酵的基本培养条件.分别在B.Braun 5 L 自控发酵罐中进行了分批发酵和补料分批发酵,针对发酵过程中工程菌生长较旺盛而表达量小的情况,改变了培养方式.比较了不同的培养条件和方式下的工程菌的生长状况和融合蛋白的表达量,得到了高产量和高表达的培养条件: 在培养过程中始终保持DO值＞30%,在对数生长期溶氧供给不足的情况下,提高搅拌速度到最大并适当补充纯氧;(2)限制性流加葡萄糖;(3)培养温度35 ℃,诱导表达温度30 ℃;(4)对数中期诱导,表达时间为4～5 h;(5)在诱导前加入新鲜培养基,稀释发酵液一倍,并以稀释后的发酵液体积为准加入诱导剂.最终使菌体的干重达10 g/L,融合蛋白表达量达23.25%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	包永明	大连理工大学环境与生命科学院	76	901	16.0	26.0
2	程波	武汉工程大学化工与制药学院	29	203	8.0	13.0
3	白凤武	大连理工大学环境与生命科学院	120	1563	21.0	33.0
4	段涛	广东药学院生命科学与生物制药学院	16	46	5.0	5.0
5	丁洁	大连理工大学环境与生命科学院	11	345	5.0	11.0
6	谢健	大连理工大学环境与生命科学院	12	109	5.0	10.0