结核分枝杆菌ESAT-6抗原适体的筛选与亲和性分析

• 作者: 王玉炯 秦莲花 胡忠义 马占忠
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 分枝杆菌 结核 ESAT-6 指数级富集配体的系统进化技术 适体
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 383-386,光盘
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4237字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0785.2007.05.012

摘要

目的 通过建立指数级富集配体的系统进化技术(SELEX),筛选结核分枝杆菌ESAT-6抗原适体的方法,获得ESAT-6的高亲和性适体,为结核病诊断和治疗试剂的开发奠定基础.方法 体外构建一个长度为78个碱基的随机单链DNA(ssDNA)文库,以微孔板为筛选介质,SELEX技术筛选获得ESAT-6的适体库,将适体库克隆、测序,用DNAMAN软件对其结构进行分析,利用生物素-链亲和素-辣根过氧化物酶显色系统测定亲和力,找出高亲和性适体.结果 经过13轮筛选,ssDNA文库与ESAT-6亲和力从0.257提高到1.163,且12轮后A值趋于平衡,克隆、测序获得ESAT-6的高亲和性适体,其中适体A10亲和力最高,达到1.515,且与CFP10-ESAT6融合蛋白无交叉反应.二级结构显示,口袋和茎环结构可能是适体与ESAT-6结合的结构基础.结论 成功建立了SELEX筛选技术,并初步获得了ESAT-6的高亲和性适体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦莲花	同济大学附属肺科医院上海市结核重点实验室	9	90	6.0	9.0
2	王玉炯	宁夏大学生命科学学院	108	671	13.0	20.0
3	马占忠	同济大学附属肺科医院上海市结核重点实验室	2	26	2.0	2.0
4	胡忠义	宁夏大学生命科学学院	1	17	1.0	1.0