结核分枝杆菌ESAT-6基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达

• 作者: 付小强 吴少庭 李晓恒 甘燕 黄汉菊
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核杆菌 ESAT-6 耻垢分枝杆菌 重组BCG
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 745-748
• 页数: 4页
• 分类号: R378
• 字数: 2941字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.08.002

摘要

目的 体外扩增结核杆菌ESAT-6 基因,并构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒ps3000-ESAT-6和重组耻垢分枝杆菌.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)方法,体外扩增结核杆菌ESAT-6基因,克隆入pGEMT载体.然后,构建亚克隆ps3000-ESAT-6大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒,经电转化方法,将ESAT-6基因的穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis mc2 155)中,热诱导此重组耻垢分枝杆菌,用SDS-PAGE电泳观察ESAT-6蛋白的表达,Western blotting鉴定其生物学活性.结果 成功扩增了结核杆菌ESAT-6基因;正确构建穿梭质粒ps3000-ESAT-6,用pET表达系统ESAT-6纯化蛋白免疫小鼠的多抗血清通过Western blot证实了该重组耻垢杆菌中有表达并具有生物学活性.结论 ESAT-6重组耻垢分枝杆菌构建成功,为下一步表达ESAT-6蛋白的重组BCG( Bacilli Calmette-Guérin)疫苗的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓恒	华中科技大学同济医学院	9	72	5.0	8.0
2	吴少庭		72	281	9.0	12.0
3	甘燕		7	20	3.0	4.0
4	黄汉菊	华中科技大学同济医学院	46	170	7.0	11.0
5	付小强	华中科技大学同济医学院	3	9	1.0	3.0