稳定高效表达BRP 44的PC-3细胞系的建立

• 作者: 吴刚 彭亮 李黔生 白巍 靳风烁
• 来源期刊: 华南国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: BRP44 PC-3细胞系 稳定转染 前列腺癌
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: R329
• 字数: 3337字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2595.2007.03.002

摘要

目的 建立稳定高效表达BRP 44的PC-3细胞系.方法 下载BRP 44的全长mRNA序列,用Oligo 6进行引物设计,在上下游引物的5'引入相应的Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ限制性内切酶识别序列及保护碱基.提取LNCaP细胞的总RNA反转录成cDNA进行PCR扩增,产物连接到真核表达载体pcDNA 3.1/myc-His A中构建成重组体.重组载体经酶切和测序鉴定后,阳离子脂质体转染法转染PC-3细胞、G 418筛选、Northern杂交检测并挑选出表达最强的亚克隆.结果 成功构建BRP 44的真核表达载体并获得高效稳定表达的BRP 44基因的PC-3细胞亚克隆.结论 高效稳定表达BRP44的PC-3细胞亚克隆可用于下一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李黔生	第三军医大学大坪医院野战外科研究所	87	413	10.0	15.0
2	靳风烁	第三军医大学大坪医院野战外科研究所	250	1228	15.0	23.0
3	吴刚	第三军医大学大坪医院野战外科研究所	61	289	11.0	13.0
4	彭亮	第三军医大学大坪医院野战外科研究所	3	10	1.0	3.0
5	白巍	第三军医大学大坪医院野战外科研究所	1	0	0.0	0.0