恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因的克隆表达及表达产物免疫原性的鉴定

• 作者: 何君 宋立华 朱虹 檀华 端青 邱少富
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 恶性疟原虫 乳酸脱氢酶 免疫原性 同源性
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 897-900
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|Q959.115.4
• 字数: 3632字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.06.003

摘要

目的:克隆表达恶性疟原虫(Plasmodium falcioarum,p.f)海南株(FCC1/HN)乳酸脱氢酶(LDH),并对其免疫原性进行鉴定,为制备抗LDH抗体用于胶体金法快速检测疟原虫奠定基础.方法:应用PCR技术对恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDHpf)基因进行特异性扩增,将扩增产物克隆入表达载体pET-32a(+),重组表达载体经鉴定后诱导表达;重组LDHpf(rLDHpf)经纯化后,免疫家兔制备兔抗rLDHpf免疫血清,间接免疫荧光和Western印迹鉴定表达产物的免疫原性.结果:构建了pET-32a/LDHpf重组表达载体,测序后同源性分析显示p.f不同株间LDH氨基酸序列同源性大于98%,不同种间同源性也在90%以上;间接免疫荧光和Western印迹分析显示rLDHpf具有较好的免疫原性.结论:LDH一基因高度保守;rLDHpf得到高效表达并具有良好的免疫原性.