草鱼肝细胞系中CYP3A活性检测方法

• 作者: 喻文娟 张书俊 李聃 杨先乐 陈昱
• 来源期刊: 上海水产大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 细胞色素P450 3A 红霉素-N-脱甲基酶 鱼类 细胞 甲醛
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 495-499
• 页数: 5页
• 分类号: S917
• 字数: 3009字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7271.2007.05.016

摘要

红霉素-N-脱甲基酶(ERND)是细胞色素P450 3A(CYP3A)依赖的酶类,可通过测定该酶催化代谢产物甲醛的量来反映其活性,从而评价CYP3A活性的高低.以草鱼肝细胞系(GCL)为模型,红霉素为底物,采用Nash比色法检测ERND产物甲醛含量,Lowry比色法测定细胞蛋白含量,建立鱼类细胞中CYP3A活性的简便检测方法.研究表明,底物以0.4 mmol/L作用60 min后进行检测较为合适.细胞样品中ERND产物甲醛平均回收率为78.80%±4.37%,平均日内精密度为2.80%±1.40%,平均日间精密度为3.91%±1.45%,通过计算探针酶ERND活性可为鱼类细胞CYP3A活性的评价提供简便可靠的方法,从而为鱼类药物代谢酶体外诱导模型的研究奠定了基础.