兔出血症病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 何孔旺 侯玉峰 张则斌 徐为中 李超美 杨龙圣 王芳 陈国强
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒(RHDV) RT-PCR 病毒分布
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 409-413
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3066字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.03.009

摘要

按照GenBank上公布的兔出血症病毒(RHDV)基因序列设计1对引物,以RHDV发病兔的新鲜肝为材料,提取总RNA,进行cDNA的合成和PCR扩增,结果能扩增出与预期的269 bp大小一致的片段,该产物序列与公布的RHDV基因序列同源性95.8%～98.5%.该方法可特异性地检测出RHDV,其最小检出RHDV的RNA浓度为1.66 ng/μL,敏感性为血凝试验(HA)的4×104倍,表明已成功地建立了RHDV RT-PCR检测方法.用该方法和HA对兔出血症发病兔各组织脏器进行检测,结果表明,在检测发病死亡兔各脏器中,HA检测阳性的病料为肝脏、肾脏、脾脏、血液和肺,而RT-PCR检测除粪便外,其它均为阳性;该方法还能够检测出-20℃保存12个月的阳性病料.表明RT-PCR方法检测RHDV特异性强、敏感度高、重复性好,不仅可用于RHD临床诊断和流行病学调查,而且在兔肉等兔类产品的检疫方面具有很好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何孔旺	江苏省农业科学院兽医研究所	101	1368	22.0	33.0
2	张则斌	江苏省农业科学院兽医研究所	21	151	6.0	12.0
3	徐为中	江苏省农业科学院兽医研究所	35	255	10.0	14.0
4	王芳	江苏省农业科学院兽医研究所	18	168	7.0	12.0
5	侯玉峰		7	46	4.0	6.0
6	杨龙圣	江苏省农业科学院兽医研究所	2	55	2.0	2.0
7	李超美		8	31	3.0	5.0
8	陈国强		1	23	1.0	1.0