兔出血症病毒RT-PCR检测方法的建立及其临床应用

• 作者: 何孔旺 徐为中 徐鹏 王芳 胡波 范志宇 薛家宾 魏后军
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 RT-PCR 鼻拭子 病毒携带
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1442-1446
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4181字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在建立检测兔群鼻拭子中兔出血症病毒(RHDV)的RT-PCR方法,研究健康免疫兔群是否存在携带RHDV现象.根据GenBank上公布的RHDV vp60基因保守序列,设计了1对特异性引物,经cDNA的合成和PCR扩增,目的片段大小为591 bp.结果表明该方法能检出最小RNA浓度为2.40 ng·μL-1,敏感性为血凝试验(HA)的8×103倍.通过对自5个省采集的168份健康免疫兔鼻拭子样品进行检测,结果显示,阳性样品为22份,阳性率为13.09%.试验表明:RT-PCR方法能快速、敏感地从健康免疫兔鼻拭子样品中检出RHDV,提示健康免疫兔群存在携带RHDV的现象,该方法适合临床进行大规模病原学检测和兔群携带病毒的调查,具有良好的应用前景.