α1-酸性糖蛋白单克隆抗体的制备及检测方法的建立

• 作者: 席仲兴 张云涛 张正雷 张甲菊 彭林峰 杨福军 路东
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: α1-酸性糖蛋白 杂交瘤 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 诊断制品
• 页码范围: 924-929
• 页数: 6页
• 分类号: R446.61|R917
• 字数: 4815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2007.12.016

摘要

目的 制备α1-酸性糖蛋白(α1-Acid glycoprotein,α1-AGP)单克隆抗体(McAb),建立α1-AGP的ELISA检测方法,用于检测人体血液、尿液及各种组织液中α1-AGP的水平.方法 用高氯酸沉淀人血清中α1-AGP,经离子交换层析和高压液相层析纯化后,免疫BALB/c小鼠,建立特异性抗α1-AGP单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备并鉴定McAbs,分析各株分泌抗体的效价、特异性、位阻群、类及亚类.制备针对α1-AGP的双抗体夹心ELLSA检测试剂盒,分析其稳定性、灵敏度和特异性,并进行临床评价.结果 建立了9株特异性抗α1-AGP单克隆抗体杂交瘤细胞株,均分泌IgG抗体,所有抗体的轻链均为κ链.根据位阻分析结果,将9个细胞株分泌的抗体分为5个位阻群,腹水效价在1×10-4～×10-7之间,且均有较好特异性.制备的α1-AGP双抗体夹心ELISA试剂盒灵敏度达2 ng/ml,且检测结果与α1-AGP含量呈现良好的线性关系(γ=0.9916),并与其他血清蛋白无交叉反应,试剂盒置37℃放置3d及4℃放置2个月,稳定性良好.用该试剂盒检测96份正常人血样,其α1-AGP平均值为0.43～1.32mg/ml;105份Ⅱ型糖尿病患者血样,其平均值为0.88～2.35mg/ml,经统计学分析,两者差异有显著意义.结论 已成功制备出α1-AGP McAb,并建立了针对α1-AGP的双抗体夹心ELISA,制备的试剂盒可用于临床检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	路东	兰州生物制品研究所诊断用品室	11	29	3.0	5.0
2	杨福军	兰州生物制品研究所诊断用品室	12	42	4.0	6.0
3	席仲兴	兰州生物制品研究所诊断用品室	11	27	3.0	5.0
4	彭林峰	兰州生物制品研究所诊断用品室	6	8	2.0	2.0
5	张甲菊	兰州生物制品研究所诊断用品室	7	48	3.0	6.0
6	张云涛	兰州生物制品研究所诊断用品室	12	60	4.0	7.0
7	张正雷	兰州生物制品研究所诊断用品室	8	37	3.0	6.0