牛疱疹病毒Ⅰ型二重LUX荧光PCR鉴别检测方法的建立

• 作者: 刘琳琳 曹永长 曾彩云 曾碧健 毕英佐 罗琼 陈茹
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: LUX引物 二重荧光PCR 牛疱疹病毒Ⅰ型 牛传染性鼻气管炎 牛传染性化脓性外阴阴道炎
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 944-949
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.1|Q503
• 字数: 5021字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.11.008

摘要

采用LUX新型荧光PCR技术原理,建立了快速检测牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)以及鉴别野毒感染和基因缺失疫苗免疫动物的二重实时荧光PCR方法.结果显示,该方法对多株BHV-1病毒均呈典型gE、gC双基因阳性反应,对其他常见动物疱疹病毒以及健康牛基因组DNA等均呈阴性反应;对细胞增殖病毒液的gE、gC双基因鉴别的检测敏感性可达0.4～0.04 TCID50,比常规PCR方法高100倍以上;对带毒牛血清、抗凝全血、牛新鲜精液和冷冻精液基因鉴别的检测敏感性分别达0.04 TCID50、0.4 TCID50、0.4 TCID50和4 TCID50.采用该方法从临床牛血样、鼻拭子样品中检出IBRV阳性样品,检测全程仅需约2 h.对单基因克隆质粒的检测进一步证实该方法能特异地鉴定gE、gC基因,检测灵敏度分别达90、30拷贝.结果表明,该方法可应用于临床快速诊断BHV-1病毒感染,鉴别BHV-1病毒感染与对应的基因缺失疫苗免疫动物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕英佐	华南农业大学动物科学学院	216	2631	28.0	41.0
2	曹永长	华南农业大学动物科学学院	111	1387	20.0	31.0
3	陈茹		25	163	8.0	11.0
5	曾碧健		9	63	5.0	7.0
6	罗琼		7	48	5.0	6.0
7	曾彩云	华南农业大学动物科学学院	3	18	3.0	3.0
10	刘琳琳		1	9	1.0	1.0