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含内质控的新型检测HIV-1感染的双特异性探针实时荧光RT-PCR方法的建立
含内质控的新型检测HIV-1感染的双特异性探针实时荧光RT-PCR方法的建立
作者:
李金明
王露楠
邓巍
黄杰
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
HIV-1
核酸探针
聚合酶链反应
摘要:
目的 以包含内标RNA的病毒样颗粒作为内质控,建立一种新型的检测HIV-1感染的包含双特异探针实时荧光RT-PCR方法(Dual-specificity probe real-time reverse transcriptase-PCR,DSPrtRT-PCR),提高HIV-1RNA的检出率.方法 采用针对HIV-1基因组保守区域内两个不同区域的两条不同的荧光探针和两组引物,建立检测HIV-1RNA的实时荧光RT-PCR方法,并构建了内含HIV-1内标RNA的病毒样颗粒,将其作为本方法的内部假阴性质控,考察了所建立方法的检测灵敏度和特异性.比较了单探针和双探针检测方法在HIV-1亚型检测能力、检测灵敏度和临床样本的检测适用性.结果 所建立方法的灵敏度为125 U/ml;在检测HIV-1阴性样本时具有100%的特异性.和单探针方法比较,双特异探针方法在HIV-1亚型检测中能检测到M族的所有亚型以及O族;检测灵敏度和单探针方法比较无统计学意义;在对60份临床样本的检测中,单探针方法只能检出39份,而双探针方法能检出50份(10份检测阴性的样本用COBAS检测证明为阴性).结论 本研究建立的HIV-1 RNA的DSPrtRT-PCR具有很高的检测灵敏度以及HIV-1多亚型的检测能力.在对临床样本的检测中证明具有很好的临床适用性.
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文献信息
篇名
含内质控的新型检测HIV-1感染的双特异性探针实时荧光RT-PCR方法的建立
来源期刊
中华检验医学杂志
学科
医学
关键词
HIV-1
核酸探针
聚合酶链反应
年,卷(期)
2007,(8)
所属期刊栏目
新技术与新方法
研究方向
页码范围
929-933
页数
5页
分类号
R4
字数
3704字
语种
中文
DOI
10.3760/j.issn:1009-9158.2007.08.024
五维指标
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
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引文网络
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参考文献
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HIV-1
核酸探针
聚合酶链反应
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华检验医学杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1009-9158
CN:
11-4452/R
开本:
大16开
出版地:
北京市西城区宣武门东河沿街69号
邮发代号:
2-71
创刊时间:
1978
语种:
chi
出版文献量(篇)
7229
总下载数(次)
38
总被引数(次)
76070
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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