树鼩IL-2TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 代解杰 夏雪山 孙晓梅 徐娟 李晓飞 殷安国 王文广 黄晓燕
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 树鼩 IL-2 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 36-40,49
• 页数: 6页
• 分类号: R-332
• 字数: 3895字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671.7856.2013.007.009

摘要

目的 建立检测树鼩IL-2基因TaqMan探针实时荧光定量PCR方法.方法 以经ConA诱导培养的树鼩淋巴细胞总RNA为材料,设计特异性引物,通过RT-PCR技术克隆出树鼩IL-2基因,以构建的树鼩IL-2基因质粒为标准品,建立标准曲线,并进行灵敏度检测.结果 建立了树鼩IL-2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,此法检测灵敏度高,线性范围可达102～109拷贝/ul.结论 成功建立了树鼩IL-2实时荧光定量PCR方法,此方法灵敏度高、特异性强,检测周期短,为探讨IL-2作用的分子作用机制奠定基础.