人杀菌通透性增强蛋白功能性N端片段在酵母细胞表面的展示和鉴定

• 作者: 吕喆 孔庆利 孙宝清 安云庆 李慎涛 李晶琴 温铭杰 许子华
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人杀菌通透性增强蛋白 酵母表面展示 内毒素
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 738-742
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 4554字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立BPI23酵母细胞表面展示方法,使之表达具有生物活性的BPI23蛋白.方法:构建pYD1-BPI600重组质粒,转化酵母细胞,经半乳糖诱导使BPI23在酵母细胞表面表达;采用间接免疫荧光法,用荧光显微镜和流式细胞仪检测BPI23在酵母细胞表面的展示情况;采用鲎基质显色法,检测BPI23 中和内毒素的生物学活性.结果:酶切和DNA测序鉴定证实,pYD1-BPI600重组质粒含有人BPI600基因片段.荧光显微镜和流式细胞仪检测结果显示,BPI23在pYD1-BPI600重组质粒转化的酵母细胞表面得到展示;在诱导后第24小时展示BPI23的酵母细胞数占总细胞数的39%.酵母细胞表面展示的BPI23具有中和内毒素的活性.结论:成功构建了pYD1-BPI600酵母表达载体,转化后在酵母细胞表面展示了功能性目的蛋白,为BPI23突变体库的建立和功能优化BPI23突变体的筛选奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李慎涛	首都医科大学免疫学系	29	94	5.0	8.0
2	安云庆	首都医科大学免疫学系	50	269	9.0	15.0
3	吕喆	首都医科大学免疫学系	24	76	5.0	7.0
4	孔庆利	首都医科大学免疫学系	21	75	5.0	8.0
5	温铭杰	首都医科大学免疫学系	19	66	5.0	7.0
6	孙宝清	首都医科大学燕京医学院	36	104	6.0	8.0
7	许子华	首都医科大学燕京医学院	38	113	5.0	8.0
8	李晶琴	首都医科大学免疫学系	20	70	4.0	7.0