脂质体介导哺乳动物细胞转染的改良方法

• 作者: 万敏 于永利 吴秀丽 尹晓光 王丽颖 王艳媚
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂质体 改良方法 pcDNA-GFP-PSA 共聚焦显微镜 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 260-262
• 页数: 3页
• 分类号: R392.33
• 字数: 2326字
• 语种: 中文

摘要

目的:提高脂质体介导的细胞转染效率.方法:在传统的脂质体生化转染过程中,介入了简单的物理转染技术,并应用有限稀释克隆技术和共聚焦荧光显微镜检测技术,对转染细胞进行了早期克隆筛选,用流式细胞术对转染细胞表达GFP的阳性率进行检测.结果:流式细胞术检测显示,通过改良法获得转染pcDNA3-GFP-PSA质粒的B16、RM1和EL4细胞,表达报告蛋白GFP的阳性百分率(26%、24%和40%)高于传统法转染的细胞(16%、16%和18%).改良法转染的B16、RM1和EL4经过克隆筛选、液氮冻存、水浴复苏和体外连续培养2周后,外源基因报告蛋白GFP表达的阳性百分率分别为77%、69%和83%.在转染流程上,通过改良法获得单克隆转染细胞株的时间明显缩短.结论:改良的脂质体转染方法结合细胞克隆技术,能在最短时间内获得高表达外源基因的转染细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于永利	吉林大学基础医学院免疫教研室	86	281	8.0	12.0
2	王丽颖	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	82	282	9.0	13.0
3	尹晓光	吉林大学基础医学院免疫教研室	6	22	2.0	4.0
4	吴秀丽	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	27	81	4.0	8.0
5	万敏	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	24	116	5.0	10.0
6	王艳媚	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	2	17	1.0	2.0