人三叶因子1大肠杆菌及毕赤酵母表达载体的构建与鉴定

• 作者: 吕尚军 吴炜 孙勇 张勇 彭曦
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 三叶因子1 基因重组 毕赤酵母 表达载体 质粒构建
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1138-1141
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 4141字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6273.2007.08.006

摘要

目的:构建人三叶因子1(hTFF1)的大肠杆菌及毕赤酵母表达载体.方法:从人胃窦部提取总RNA,经RT-PCR得到hTFF1 cDNA,用PCR方法扩增hTFF1基因,并将其分别克隆到大肠杆菌的表达载体pET32α及毕赤酵母的表达载体pGAPZαA中,构建原核及真核重组表达质粒pET32α-hTFF1和pGAPZαA-hTFF1.结果:通过双酶切和基因序列分析确定插入pET32α和pGAPZαA中的片段为hTFF1基因片段.结论:重组质粒pET32α-hTFF1和pGAPZαA-hTFF1成功构建,为在比较原核和真核细胞中hTFF1高效表达的情况及下一步的功能研究奠定了基础.