人肠三叶因子毕赤酵母表达载体的构建及稳定整合菌珠的筛选

• 作者: 吕尚军 孙勇 张勇 彭曦 汪仕良
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 人肠三叶因子 毕赤酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 918-920
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 3106字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2006.10.027

摘要

目的构建hITF毕赤酵母分泌型表达载体,获得稳定整合酵母菌珠,为大量获得重组hITF、进行功能研究奠定基础.方法通过PCR获得hITFcDNA 片段,将目的基因插入酵母表达载体pPICZαA分泌信号下游,得到重组载体pPICZαA-hITF .SacⅠ线性化后氯化锂转化进入X-33,Zeocin筛选转化酵母菌,PCR鉴定目的基因,MD、MM鉴定基因型.结果经测序证实PCR扩增的hITFcDNA与基因文库中的完全一致并准确插入酵母表达载体pPICZαA中,氯化锂转化后,PCR鉴定证明重组载体整合进入酵母基因组中,基因型鉴定表明获得的酵母菌株均为Mut+.结论成功构建出酵母表达载体pPICZαA-hITF,获得稳定整合hITFcDNA的酵母菌株,为hITF的大量表达及其功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙勇	江苏省徐州市解放军第97医院烧伤整形科	4	6	2.0	2.0