人肠三叶肽在大肠杆菌中的表达

• 作者: 徐佳楠 王昕 路睿 陈宪 陈建平
• 来源期刊: 四川大学学报(医学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 人肠三叶肽TFF3 蛋白质表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 114-117
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2829字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2010.01.025

摘要

目的 构建三叶肽(TFF)原核重组质粒pET32a-TFF3,实现TFF3融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达并鉴定表达产物.方法 用Trlzol试剂提取人结肠组织mRNA,逆转录后经PCR扩增得到不含信号肽的TFF3编码序列,插入原核表达载体pET32a,构建pET32a-TFF3重组质粒,转化大肠杆菌BL-21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达蛋白.结果 酶切和测序证实pET32a-TFF3重组质粒构建成功.SDS-PAGE分析表明在IPTG浓度为1 mmol/L时,诱导6 h后蛋白表达量最大.Western blot分析表明,TFF3融合蛋白相对分子质量约为24×10~3,其能与兔源TFF3抗体特异性结合.结论 成功构建了pET32a-TFF3重组质粒,实现了该基因在大肠杆菌中的高效表达,为后续深入研究TFF3奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈建平	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	78	217	7.0	9.0
2	王昕	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	31	149	7.0	11.0
3	路睿	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	6	3	1.0	1.0
4	徐佳楠	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	5	3	1.0	1.0
5	陈宪		1	1	1.0	1.0