靶向23S rRNA的多肽核酸体外抑制细菌蛋白翻译

• 作者: 安仙园 潘杰 诸葛洪祥 黄学文
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多肽核酸(PNA) 反义抑制 23SrRNA 体外翻译系统
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 358-362
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3452字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2007.04.018

摘要

目的 尝试研究反义多肽核酸(peptide nucleic acid,PNA)在体外翻译系统中抑制细菌蛋白的翻译.方法 以增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)为报告分子,将重组载体pET-28a-EGFP和靶向23S rRNA domainⅡ区的PNA在体外翻译系统中共同孵育后,用荧光显微镜观察荧光强度减弱,放射自显影证明荧光强度减弱是因为EGFP减少.为了分析PNA体外抑制蛋白翻译的浓度,我们用蛋白沉淀方法分析PNA体外抑制[35S]-methionine渗入蛋白比例.最后,用浊度分析观察PNA(G1138)在MH肉汤培养基中的抑菌作用.结果 在体外翻译系统中,靶向23S rRNA domainⅡ区的PNA(G1138)以剂量和序列依赖方式抑制蛋白合成,抑制浓度(IC50)为0.15μmolL.在MH培养基中,PNA(G1138)抑菌效果不明显(MIC＞50μmol/L).结论 靶向23S rRNA domainⅡ区的PNA(G1138)在体外翻译系统中能有效抑制细菌蛋白合成.在MH肉汤培养基中,PNA(G1138)抑菌效果不明显.