木霉T88 β-l,6-葡聚糖酶(BGN16.2)的基因克隆、表达及同源建模

• 作者: 丛华 宋金柱 杨谦 葛唯
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: β-l,6-葡聚糖酶 细胞壁水解酶 同源建模 三级结构 木霉菌T88
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 页码范围: 51-57
• 页数: 7页
• 分类号: S855.12|Q785
• 字数: 4397字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2007.05.014

摘要

利用RT-PCR方法克隆得到β-l,6-葡聚糖酶BGN16.2的cDNA序列,并采用半定量RT-PCR法,研究以茯苓粉及病原菌细胞壁为诱导物对该基因诱导表达的影响.构建该酶基因到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2上,转化酿酒酵母,用CMC糖化力法对目的基因表达产物的酶活性进行检测.克隆得到BGN16.2的cDNA基因开放阅读框长度为1 290 bp,编码429个氨基酸,推测蛋白分子量为48 kDa,预测的等电点pI为5.25.该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的β-l,6-葡聚糖酶并分泌到胞外.发酵液中的酶活在培养60 h时达到最高(2.1 U·mL-1),最适酶解温度为50 ℃,最适pH值为5.5.对该酶的一二级结构进行生物信息学分析的基础上,利用同源建模的方法完成了该酶的活性区域三级结构的建模.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨谦	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	191	3458	29.0	49.0
2	宋金柱	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	28	602	14.0	24.0
3	丛华	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	7	61	4.0	7.0
4	葛唯	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	1	0	0.0	0.0