重组腺病毒构建及介导报告基因在豚鼠耳蜗中的表达

• 作者: 刘英鹏 李泽文 沈安民 王国鹏 王建亭 陈沛 龚树生
• 来源期刊: 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 载体 细菌内同源重组 基因转移技术 耳蜗
• 年，卷（期）: 2007,（16）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 748-751
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1
• 字数: 3101字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1781.2007.16.010

摘要

目的:带绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒,为利用重组腺病毒介导外源基因转导内耳提供依据.方法:通过细菌内同源重组方法构建携带有报告基因的重组腺病毒(Ad-GFP),将重组腺病毒经耳蜗底回途径导入豚鼠耳蜗鼓阶外淋巴后,观察手术后不同时间GFP基因在豚鼠耳蜗内的表达、分布情况;检测手术前后听觉脑干诱发电位,观察手术和病毒对豚鼠听觉功能的影响.结果:构建的重组腺病毒经酶切电泳鉴定正确;豚鼠耳蜗底回途径导入腺病毒24 h后即有报告基因表达,3 d后最高,表达时间可持续2周以上;报告基因表达部位主要分布在血管纹、鼓阶外淋巴面的间皮细胞和耳蜗Corti器等部位;听觉脑干诱发电位(ABR)在各组动物手术前后无明显改变.结论:成功构建了携带GFP基因的重组腺病毒,通过该方法构建的腺病毒可以介导报告基因在豚鼠耳蜗中表达,并且对豚鼠听觉功能无明显影响,为内耳基因治疗提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘英鹏	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	19	60	5.0	6.0
2	王国鹏	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	10	53	4.0	7.0
3	沈安民	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	1	3	1.0	1.0
4	王建亭	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	10	17	3.0	3.0
5	陈沛	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	24	104	6.0	8.0
6	李泽文	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	10	25	3.0	5.0