口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因重组杆状病毒的构建与表达

• 作者: 刘在新 卢曾军 曹轶梅 杨孝朴 祝秀梅 郭建宏 郭慧琛 马江涛
• 来源期刊: 甘肃农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 3ABC基因 杆状病毒 Sf9细胞
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学·动物医学
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3920字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4315.2007.04.002

摘要

通过设计特异引物,扩增获得口蹄疫病毒3ABC编码区的目的基因片段,将其用Sal Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切后,与经同样处理的带有一段信号肽序列的穿梭质粒pMelBac-B连接,经筛选、鉴定及DNA序列分析后,获得重组质粒pMel-3ABC.将重组质粒与线性化的杆状病毒骨架Bac-N-Blue共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了含有目的基因的重组杆状病毒.用重组病毒感染Sf9昆虫细胞,通过间接ELISA 方法,检测细胞培养基上清液中表达的口蹄疫病毒抗原.结果表明,口蹄疫病毒基因片段3ABC正确克隆到杆状病毒载体上,重组病毒可在昆虫细胞中表达目的蛋白.