慢病毒shRNA表达载体介导人肿瘤细胞基因稳定沉默的影响因素

• 作者: 宋宝 宋现让 柳永蕾 王兴武 迟伟玲 魏玲
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乏氧诱导因子-1α 慢病毒载体 RNA干扰 整合
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 19-23
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3647字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2007.02.004

摘要

目的:探讨慢病毒载体介导人肿瘤细胞RNA干扰的影响因素.方法:用介导RNAi的慢病毒载体Lenti6-HIF1α和Lenti6-HIF1β分别转导人肿瘤细胞系Hela、SPCA1和A549,筛选靶基因稳定表达沉默的细胞株.病毒RNA分子拷贝数和靶基因mRNA水平用实时定量RT-PCR确定.结果:针对不同靶基因的慢病毒转导肿瘤细胞的效率与靶基因无关、存在细胞类型特异性.8h内病毒转导效率与吸附时间呈正关,12h后继续延长吸附时间不能提高转导效率.对靶基因表达的特异性抑制效果与病毒量呈正相关.靶基因稳定沉默细胞株的RNAi效果与细胞类型无关,与靶细胞基因组整合的shRNA表达结构的拷贝数呈正相关.结论:慢病毒载体介导人肿瘤细胞RNA干扰,短期基因抑制效果取决于细胞类型、病毒量和病毒的吸附时间,稳定基因沉默效果与病毒整合到靶细胞基因组的拷贝数相关,筛选稳定基因沉默细胞株时,应尽可能提高病毒量以提高病毒整合的拷贝数.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王兴武	山东省肿瘤医院基础研究中心	85	423	12.0	15.0
2	宋现让	山东省肿瘤医院基础研究中心	109	609	13.0	17.0
3	魏玲	山东省肿瘤医院基础研究中心	78	422	11.0	15.0
4	宋宝	山东省肿瘤医院基础研究中心	32	185	8.0	11.0
5	迟伟玲		11	19	3.0	4.0
6	柳永蕾	山东省肿瘤医院基础研究中心	12	78	5.0	8.0