肺炎链球菌自溶酶蛋白抗原表位的预测、克隆及重组表达

• 作者: 何思杰 吕志跃 吴忠道 张莉滟 甘慧泉 童荔 郑焕钦 鲜墨
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎链球菌 LytA表位预测 重组表达
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 453-458
• 页数: 6页
• 分类号: R378.1
• 字数: 5358字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.05.008

摘要

目的 用生物信息学的方法预测肺炎链球菌自溶酶蛋白(LytA)可能的抗原表位,合成带有linker(Gly4Ser1)3序列的融合基因片断(l1l2),并在原核系统表达.方法 利用多种生物信息学软件,在二级结构预测抗原表位分值的基础上结合单参数分析结果,预测并设计LytA可能的重组抗原表位(L1L2).扩增该表位基因1112,利用分子克隆技术构建重组质粒.经测序鉴定后,转入宿主菌JM109中原核表达L1L3多肽片断与载体标签蛋白还原性谷胱苷肽(GST)的融合蛋白GST-L1L2.结果 预测表明序列2～28(EINVSKLRTDLPQVGVQPYRQVHAHST)、序列98～112(FMTDYRLYIELLRNL)分别为可能的B细胞和T细胞抗原表位.用PCR技术合成了l1l2片段,构建重组质粒pGEX-4T-1-l1l2,成功转化大肠杆菌JM109.结论 经测序验证成功构建了重组质粒pGEX-L1L2,并转化大肠杆菌JM109,SDS-PAGE分析显示该重组质粒在原核系统中得到了表达,为后继多肽疫苗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴忠道	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	171	835	14.0	21.0
2	张莉滟		30	215	8.0	12.0
3	吕志跃	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	14	67	5.0	8.0
4	郑焕钦	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	25	151	7.0	11.0
5	童荔	华中科技大学同济医院器官移植研究所	3	4	1.0	2.0
6	甘慧泉		6	15	2.0	3.0
7	鲜墨	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	2	5	1.0	2.0
8	何思杰	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	2	9	2.0	2.0