应用real-time PCR测定幼兔肠道内双歧杆菌和乳杆菌的变化

• 作者: 蔡威 陈津津
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 双歧杆菌 乳杆菌 实时荧光定量PCR技术 肠外营养
• 年，卷（期）: 2007,（31）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3278-3283
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 5318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.31.006

摘要

目的:通过研究PN过程中肠道双歧杆菌和乳杆菌的变化,探讨PN导致肠屏障功能障碍的机制.方法:将新西兰种白兔16只,分成对照组(正常兔食饲养)和PN组(幼兔完全肠外营养).10 d后自直肠取出新鲜粪便,抽提所有细菌DNA,常规PCR检测合成的双歧杆菌和乳杆菌属引物的特异性.应用青春双歧杆菌和植物乳杆菌作外标准品,梯度稀释制作标准曲线,作灵敏度测定.应用SYBR Green Ⅰ Real-time PCR法,定量检测粪便中双歧杆菌和乳杆菌含量.结果:琼脂糖凝胶电泳显示两种引物特异性良好,灵敏度达到102个菌.溶解曲线显示单一峰形,说明没有引物二聚体形成.粪便细菌定量结果显示,PN组幼兔湿粪(0.05 g)中双歧杆菌和乳杆菌含量显著低于对照组(4.62±0.24,4.29±0.49 vs 5.84±0.92,5.14±1.07;P＜0.01).结论:Real-time PCR法能准确迅速地对幼兔粪便双歧杆菌和乳杆菌进行定量检测.长期肠外营养导致的肠屏障障碍可能与肠内双歧杆菌和乳杆菌的数量减少有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡威	上海交通大学医学院附属新华医院临床营养中心	110	848	14.0	24.0
2	陈津津	上海交通大学医学院附属新华医院急救中心	24	93	7.0	9.0