稳定表达GFP的胚胎干细胞株的建立及其生物学特性研究

• 作者: 张苏明 朱桂金 钱坤 陈红
• 来源期刊: 中国优生与遗传杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 绿色荧光蛋白 生物学特性
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 生殖保健与计划生育
• 页码范围: 92-95
• 页数: 4页
• 分类号: R321-33
• 字数: 3072字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-9534.2007.10.056

摘要

目的 建立稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的胚胎干细胞株,为探索胚胎干细胞及其衍生细胞移植后在体内的分化、迁移及整合提供细胞模型.方法 构建含Neo抗性基因质粒pCX-EGFP-Neo'并用脂质体转染胚胎干细胞系ES-D3,G418筛选得到稳定表达的细胞株.细胞计数检测其倍增时间、流式细胞仪分析细胞周期,酶组织化学检测碱性磷酸酶(AKP)的表达,免疫组化检测阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)并观察其体外分化能力.结果 该细胞株可在体外形成拟胚体及各种形态的成熟细胞且均可发出绿色荧光.该细胞株的倍增时间约为12h,G0/G、G2/M、S期分别为22.16±2.03%、18.46±1.54%、59.38±5.76%.倍增时间和细胞周期与未转染GFP的ES-D3相比没有显著性差异(P＞0.05).碱性磷酸酶(AKP)和SSEA-1呈强阳性表达.结论 我们成功地建立了稳定表达GFP的胚胎干细胞株,且其生物学特性未受到GFP的影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张苏明	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科	315	1877	20.0	27.0
2	朱桂金	华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心	146	1034	16.0	23.0
3	钱坤	华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心	47	251	8.0	12.0
4	陈红	华中科技大学同济医学院附属同济医院康复医学科	102	521	13.0	19.0