人热休克蛋白90β基因沉默质粒的构建及转染效率的观察

• 作者: 周元国 季业伟 徐晓玉 李平 聂滨
• 来源期刊: 重庆医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 热休克蛋白90 RNAi 基因转染 应激
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-11
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 3066字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-3626.2007.01.003

摘要

目的:构建能表达小发夹RNA,从而特异、有效抑制人Hsp90βmRNA水平的质粒,比较该质粒对不同细胞株的转染效率.方法:合成3条对应于靶基因3个区域的64nt寡聚核苷酸,插入pSUPER EGFP1质粒,用DH5α细菌扩增,用酶切和测序法鉴定.以绿色荧光蛋白表达为标记,比较不同比例脂质体和质粒条件下,HepG2、HUVEC、HeK293 3种细胞株的转染效率.结果:构建的pSuper-Hsp90β1、pSuper-Hsp90β2、pSuper-Hsp90β3 3个重组沉默质粒,插入片段碱基完全正确.在相同条件下,所构建的质粒对HeK293细胞转染效率最高,HepG2细胞最低.结论:利用pSUPER质粒可成功构建人Hsp90β基因沉默质粒,该质粒对细胞株的转染效率可因细胞的不同而有显著差异.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周元国	第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心	66	298	7.0	13.0
2	徐晓玉	重庆医科大学药学院	49	1403	22.0	37.0
3	季业伟	第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心	4	3	1.0	1.0
7	聂滨	第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心	1	2	1.0	1.0
11	李平	第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心	50	501	10.0	21.0