肾上腺髓质素真核表达质粒的构建及其在大鼠近端肾小管上皮细胞中的表达

• 作者: 乔晞 李荣山 王利华 董华 邵珊
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 肾上腺髓质素 基因克隆 真核表达 大鼠
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 899-902
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 3093字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2007.10.011

摘要

目的 构建大鼠肾上腺髓质素(ADM)真核表达质粒,观察其在大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)中的表达.方法 提取大鼠肾上腺组织总RNA,RT-PCR扩增ADM全长cDNA;将扩增产物连接于pMT-18T载体,双酶切及测序鉴定重组质粒.用限制性内切酶BamHⅠ/EcoRⅠ分别对pMT-18T-ADM和真核表达质粒pcDNA3.1双酶切;将目的基因定向克隆到pcDNA3.1载体上;对重组质粒进行双酶切鉴定.将重组质粒通过脂质体介导转染NRK-52E,RT-PCR检测ADM表达.结果 特异扩增出ADM片段,大小为585 bp;片段成功插入pcDNA3.1载体中.RT-PCR方法证明NRK-52E中存在ADM高表达.结论 成功构建大鼠ADM真核表达质粒,并将其成功转染NRK-52E.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李荣山	山西医科大学第二临床医学院肾内科	209	1017	14.0	21.0
2	邵珊	山西医科大学第二临床医学院肾内科	36	173	8.0	11.0
3	乔晞	山西医科大学第二临床医学院肾内科	46	154	7.0	10.0
4	王利华	山西医科大学第二临床医学院肾内科	72	325	6.0	15.0
5	董华	山西医科大学第二临床医学院肾内科	5	20	3.0	4.0