条锈菌诱导的小麦β-1,3-葡聚糖酶基因编码区的克隆及原核表达

• 作者: 刘博 崔素萍 康振生 王晓杰 黄丽丽
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 条锈菌 小麦 β-1,3-葡聚糖酶基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 125-129
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3246字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-9387.2007.06.026

摘要

为研究小麦与条锈菌互作过程中β-1,3-葡聚糖酶基因的功能,根据小麦β-1,3-葡聚糖酶cDNA全长序列设计合成引物,通过RT-PCR方法获得小麦β-1,3-葡聚糖酶基因编码区,将其克隆至pGEM T-easy Vector,经Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切回收目的片断,并将其定向克隆到pET-32a(+)Vector中构建表达载体GLU-pET-32a(+),转化E.coli BL 21(DE3),用IPTG进行诱导表达.结果表明,小麦β-1,3-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中得到了高效表达,获得了分子量约为49 ku的融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的19%.最佳诱导条件为:0.3 mmol/L IPTG,37℃诱导4 h.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄丽丽	西北农林科技大学植保学院	152	1965	27.0	36.0
2	王晓杰	西北农林科技大学植保学院	25	161	8.0	12.0
3	刘博	西北农林科技大学植保学院	3	10	1.0	3.0