EGF通过PI3K/AKT通路诱导人晶状体上皮细胞移行

• 作者: 万寅生 姚进 毕志刚 蒋沁
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 后囊膜混浊 表皮生长因子 细胞信号通路
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 344-348
• 页数: 5页
• 分类号: R776
• 字数: 3968字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2007.05.006

摘要

目的 研究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导人晶状体上皮细胞移行及其信号通路机制.方法 培养人晶状体上皮细胞,用不同浓度EGF处理24 h后,Phagokinetic Track Motility分析细胞的移动性;EGF(100 μg·L-1)孵育细胞不同时间后,Western blot法检测磷酸化EGFR和AKT,并分别用PD153035(EGFR激酶抑制剂)和LY294002(PI3K/AKT抑制剂)预孵育细胞,观察上述指标;EGF(100 μg·L-1)孵育细胞不同时间(12 h、24 h、48 h)后,用酶谱法分析基质金属蛋白酶-2(matrix metallopreteinase2,MMP-2),并用PD153035、LY294002预孵育细胞,检测MMP-2活性及细胞的移行.设立对照组,结果进行单因素方差分析,P＜0.05表明差异有统计学意义.结果 EGF可诱导培养人晶状体上皮细胞移行,并随浓度增加细胞的移动性有显著性提高;EGF可诱导EGFR和AKT磷酸化,EGF处理后5 min,EGFR和AKT的磷酸化达到峰值,作用可持续1 h,EGFR抑制剂可阻断EGF诱导的AKT磷酸化;EGF可显著提高细胞中MMP-2的活性,并随时间延长活性增强,24～48 h达到较高水平(1.4倍),PD153035、LY294002可抑制MMP-2的活性以及细胞的移行.结论 在人工培养的人晶状体上皮细胞中,EGFR/PI3K/AKT通路介导了EGF刺激MMP-2的激活和体外培养人晶状体上皮细胞的移行,这一通路可被EGFR激酶抑制剂、PI3K/AKT抑制剂阻断,这些涉及的信号通路可能形成潜在的治疗后囊膜混浊的靶点.