小鼠SOCS1基因重组腺病毒载体的构建及其在树突状细胞中的表达

• 作者: 焦洋 秦杰 谭建明 钟翠平 陈晓波
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒载体 细胞因子信号抑制因子-1 树突状细胞
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1445-1447,1450
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 3314字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6273.2007.10.002

摘要

目的:构建含小鼠细胞因子信号抑制因子-1基因(SOCS1)的重组腺病毒载体(AdSF35-SOCS1),探讨其介导SOCS1基因在小鼠树突状细胞中的表达.方法:设计含AgeI和NheI酶切位点的SOCS1基因上下游引物,以质粒pEF-FLAG-1/mSOCS1为模版,通过PCR扩增获得SOCS1全部序列,片段回收后经AgeI和NheI酶切,再定向插入到经AgeI和NheI酶切的质粒pDC316-LacZa中,获得重组穿梭质粒pDC316-SOCS1,经AgeI和NheI酶切、PCR及测序等鉴定后,用脂质体将穿梭质粒pDC316-SOCSl与腺病毒骨架质粒pBHGF35共转染293细胞,经位点特异性重组获得重组腺病毒Ad5F35-SOCS1,行PCR鉴定,经293细胞扩增、纯化制备高滴度病毒液,TCID50法测定病毒滴度.用获得的重组腺病毒感染小鼠树突状细胞,以免疫组化检测SOCS1的表达.结果:成功构建了舍小鼠SOCS1基因的重组腺病毒栽体,病毒感染滴度为1.4×10IU/ml,该载体能有效介导SOCS1基因在小鼠树突状细胞中的表达.结论:重组腺病毒载体能将SOCS1基因转入小鼠树突状细胞并有效表达,为基因转染制备耐受性树突状细胞奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟翠平	复旦大学上海医学院解剖组胚系	34	153	6.0	10.0
2	秦杰	复旦大学上海医学院解剖组胚系	6	2	1.0	1.0