人源M2二联体靶抗原BO-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定

• 作者: 仲人前 周晔 姚定康 蒋天舒 邓安梅 陈波 陈燕
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原发性胆汁性肝硬化 二氧酸脱氢酶复合体E2 2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2 BO-E2融合蛋白 蛋白印迹
• 年，卷（期）: 2007,（22）
• 所属期刊栏目: 临床经验
• 页码范围: 2465-2467
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2632字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.22.019

摘要

目的:表达二联体BO-E2重组融合蛋白,以用于人原发性胆汁性肝硬化(PBC)的早期发现和临床诊断.方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)方法扩增得到抗线粒体抗体二亚型(AMA-M2)的二个靶抗原侧链:二氧酸脱氢酶复合体E2(BCOADC-E2)、2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2(OGDC-E2)相应的基因片段,经测定序列验证后插入表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a(+)-BCOADC-E2,pET28a(+)-OGDC-E2,pET28a(+)-BO-E2,转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导表达蛋白质.表达蛋白经SDS-PAGE、Western blot等鉴定.结果:经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功地构建了3种重组质粒.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,获得3种融合蛋白.经免疫学鉴定,重组抗原片段具有AMA-M2的免疫原性.结论:重组表达的BO-E2融合蛋白将有利于PBC的实验室诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓安梅	上海长征医院实验诊断科	18	112	5.0	10.0
2	仲人前	上海长征医院实验诊断科	48	223	7.0	12.0
3	姚定康	上海长征医院实验诊断科	12	33	4.0	5.0
4	周晔	上海长征医院实验诊断科	24	88	7.0	8.0
5	陈波	上海长征医院实验诊断科	23	81	6.0	8.0
6	蒋天舒	上海长征医院实验诊断科	15	59	5.0	7.0
7	陈燕	上海长征医院实验诊断科	9	29	3.0	5.0