空肠弯曲菌peb1A基因的克隆表达及免疫性鉴定

• 作者: 孙万邦 杜联峰 汤贤英 黄俊琼
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 空肠弯曲菌 peb1A基因 载体构建 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1577-1579
• 页数: 3页
• 分类号: R392.1
• 字数: 2863字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8685.2007.09.017

摘要

目的:克隆空肠弯曲菌peb1A基因,构建其原核表达载体;鉴定重组表达产物的免疫原性.方法:PCR扩增空肠弯曲菌peb1A基因,构建pET-28a(+)-peb1A表达载体.转化E.coli BL21(DF3)后诱导表达,用SDS-PAGE鉴定表达产物.采用Ni-NTA亲和层析法收集表达的目的重组蛋白PEB1.采用CJ全菌抗体的Western blot鉴定rPEB1免疫反应性,双向免疫扩散试验鉴定rPEB1免疫家兔的抗血清效价.结果:所克隆的基因与报道的核苷酸序列同源性为99.9%,转化E.coli BL21(DE3)后,表达产物最高表达量占全菌总蛋白的33%左右,纯化后获得纯度为96%的重组蛋白.Western blot证实rPEB1能与CJ全菌抗体发生特异性免疫结合反应.兔抗rPEB1血清的双向免疫扩散效价为1∶16.结论:成功地构建了高效表达载体pET-28a(+)-peb1A,并获得rPEB1,所表达的rPEB1具有良好的免疫原性和免疫反应性,为基因工程疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄俊琼	遵义医学院珠海校区免疫学教研室	33	164	6.0	11.0
2	孙万邦	遵义医学院珠海校区免疫学教研室	102	518	12.0	17.0
3	杜联峰	遵义医学院珠海校区免疫学教研室	19	82	6.0	8.0
4	汤贤英	遵义医学院珠海校区免疫学教研室	19	52	4.0	6.0