空肠弯曲菌peb1A基因的克隆表达及免疫原性分析

• 作者: 唐泰山 姚火春 张常印 栾军 王婷 祝长青 蒋原 薛峰
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 空肠弯曲菌 peb1A 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-4
• 分类号: S852.613
• 字数: 3466字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2011.09.001

摘要

根据空肠弯曲菌基因序列设计引物,以菌株ATCC 29428为模板扩增出peb1A基因片段,定向克隆至pMD18-T载体中,并对克隆片段测序,比较所测序列与不同来源弯曲菌的同源性；用软件改造并合成peb1A基因78 bp～780 bp区间片段,PCR扩增后,构建出表达载体pET-28a(+)-peb 1Ag,转化至E.coli BL21 (DE3)后诱导表达,纯化后获得重组蛋白PEB1;将其进行Western blot分析、小鼠免疫试验.结果表明,克隆的peb1A基因序列与报道的NCTC 11168核苷酸同源性为98.1％,改造表达后的重组蛋白PEB1具有良好的抗原性和免疫原性,免疫小鼠后血清效价达1∶12 800,为空肠弯曲菌保护性抗原的研究和单克隆抗体的筛选奠定了基础.