抗氯霉素单克隆抗体的制备、纯化及其特异性鉴定

• 作者: 任立松 李研东 柳增善 沈庆丰 王颖
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 氯霉素 抗体,单克隆 纯化 亲和常数
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 技术交流
• 页码范围: 336-339
• 页数: 4页
• 分类号: S85243
• 字数: 3340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2008.02.044

摘要

目的:获得能稳定分泌高亲和力抗体的抗氯霉素杂交瘤细胞.方法:重氮化法偶联制备氯霉素(CAP)的免疫抗原和检测抗原(CAP-BSA和CAP-OVA).应用常规技术融合,三次有限稀释克隆和间接竞争ELISA法筛选杂交瘤细胞株,并鉴定抗体特异性.结果:得到一株能够稳定分泌高亲和力,特异性强抗体的杂交瘤细胞株4B12,辛酸-硫酸铵法纯化体内诱生法制备的腹水;纯化后的抗体效价>1:256 000,杂交瘤细胞染色体平均数为50±2,分泌的抗体属于IgG1亚类,相对分子质量为157.92 ku,亲和常数为8.26×108M-1;与甲砜霉素、庆大霉素、泰乐菌素、青霉素、链霉素和卡那霉素无交叉反应.结论:该细胞株可满足建立免疫学检测方法的需要和开发应用的要求.