γ-谷氨酰转肽酶的酶学性质及其转肽反应机制

• 作者: 姚忠 徐晓滢 徐虹 汪前 荀志金 韦萍
• 来源期刊: 高校化学工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: γ-谷氨酰转肽酶 纯化 性质 γ-D-谷氨酰-L-色氨酸 转肽反应机制
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 生物化工
• 页码范围: 288-293
• 页数: 6页
• 分类号: Q555.3
• 字数: 3408字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1003-9015.2008.02.019

摘要

γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,GGT)能专一地催化γ-谷氨酰基的转移,在γ-谷氨酰基类衍生物的合成方面具有重要的应用价值.今利用Bacillus subtilis NX-2发酵生产GGT,上清液中的GGT经硫酸铵沉淀后,以DEAE Sepharose FF和 Source 15 Q 两步离子交换进行纯化.以γ-D-Gln-L-Trp(SCV-07)为目的产物,研究了GGT的基本酶学性质,确定了其最适反应温度为40 ℃,最适Ph值10.0, 供体/受体浓度为5:7,最适反应时间为4 h,产物转化率可高达42%.结合反应进程曲线,分析了GGT的作用机制,并通过实验证实了GGT不仅具有转肽活性,还可催化产物的不可逆水解,这是导致产物回收率下降的关键原因.经测定得到GGT的转肽反应米氏常数(Km)为5.08 mmol·L-1,最大反应速率(rmax)为0.034 mmol·(min·L)-1;对γ-D-Gln-L-Trp的水解反应米氏常数(Km')为2.267 mmol·L-1,最大反应速率(rmax')为0.012 mmol·(min·L)-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦萍	南京工业大学制药与生命科学学院	359	3120	25.0	38.0
2	姚忠	南京工业大学制药与生命科学学院	74	446	11.0	16.0
3	徐虹	南京工业大学制药与生命科学学院	101	1346	20.0	32.0
4	荀志金	南京工业大学制药与生命科学学院	17	124	7.0	11.0
5	汪前	南京工业大学制药与生命科学学院	2	23	2.0	2.0
6	徐晓滢	南京工业大学制药与生命科学学院	8	50	4.0	7.0