病毒与非病毒载体转染新生大鼠血管纹边缘细胞的比较研究

• 作者: 孔维佳 彭炜 李隽 杨阳 胡钰娟 赵学艳 郝亚楠 钟毅
• 来源期刊: 中华耳科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 质粒pEGFP-N1 血清5型腺病毒 血清2型腺相关病毒 转染 边缘细胞 大鼠
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 221-227
• 页数: 7页
• 分类号: R339.16|R394.8
• 字数: 4928字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2922.2008.02.019

摘要

目的 通过病毒与非病毒载体对原代培养的新生大鼠内耳血管纹边缘细胞转染情况的比较,选择出适合边缘细胞的基因治疗载体.方法 用质粒(pEGFP-N1)、血清5型重组腺病毒(rAd5)以及血清2型重组腺相关病毒(rAAV2)三种载体转染新生大鼠(≤72小时)耳边缘细胞,通过对转染效率、细胞凋亡以及细胞活性的检测将三种载体加以比较.结果 对边缘细胞的转导效率依次为rAd5rAAV2pEGFP-N1,Annexin V-APC/7-AAD双染法检测转染阳性细胞的损伤情况依次为rAAV2<rAd5<pEGFP-N1,CCK-8法检测转染后的细胞活性依次为rAAV2rAd5pEGFP-N1.结论 病毒载体相对于非病毒载体以其高转导效率、低细胞毒性在对原代培养的新生大鼠耳边缘细胞的转染中表现出明显优势.与血清2型重组腺相关病毒比较,相对高效、低毒性的血清5型重组腺病毒更适用于原代培养的新生大鼠血管纹边缘细胞的基因转染研究.