kir3dl1启动子表达调控载体的构建及其在K562细胞中的活性

• 作者: 于力 高晓宁
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: kir3dl1基因 荧光素酶报告基因 基因表达调控 基因转染
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 白血病基础
• 页码范围: 258-262
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1|R733.7
• 字数: 3501字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2008.02.005

摘要

为了分析kir3dl1基因核心启动子区域的功能并明确其表达调控机制,构建了kir3dl1基因启动子-荧光素酶报告载体,分析其在K562细胞中的活性.采用PCR方法从含有kir3dl1基因转录起始位点5'侧翼区的质粒中扩增kir3dl1基因核心启动子序列,插入经BglII和NcoI双酶切的荧光素酶报告载体pGL3-Basic;采用阳离子脂质体SuperFect包裹荧光素酶报告重组子转染K562细胞,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性;采用MTT法检测脂质体-DNA复合物对细胞存活率的影响.结果表明:成功构建了含有254 bp的kir3dl1基因核心启动子序列的荧光素酶报告重组子3DLl-luc254并通过酶切及基因测序方法的鉴定;荧光素酶报告重组子在K562细胞中的荧光素酶活性明显高于阴性对照,且荧光素酶活性、相对活性持续3天无明显衰减,转染了3DLl-luc254报告质粒的K562细胞存活率在76%-92%之间.结论:成功构建了kir3dl1基因启动子-荧光素酶报告载体,本研究采用的转染系统能够有效地在K562细胞中进行基因转染,kir3dl1基因核心启动子在K562细胞中具有较高活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于力	解放军总医院血液科	174	1205	17.0	25.0
2	高晓宁	解放军总医院血液科	16	36	4.0	5.0