槭属树种ISSR-PCR反应体系的确立

• 作者: 张冬梅 苏金乐 钱又宇 魏华丽
• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 槭属树种 ISSR-PCR 反应体系
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 页码范围: 51-54
• 页数: 4页
• 分类号: S792.35
• 字数: 2746字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3924.2008.01.014

摘要

采用改良CTAB法提取槭属树种总DNA,分析了Taq聚合酶、样本浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度以及引物浓度对ISSR-PCR扩增结果的影响,用四因素三水平正交法确定了Taq酶浓度、引物浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度的最佳组合,并优化模板浓度,建立了稳定、可重复的槭属树种ISSR-PCR最佳反应体系及PCR扩增参数.ISSR-PCR的最佳反应体系为:在10 μL的反应体系内,Taq聚合酶宜加入0.25 U,dNTP最适浓度为0.3mmol/L,模板最适浓度为4 ng/μL,引物最适浓度均为0.5 μmol/L,不同的引物有其各自合适的Mg2+浓度.槭属树种ISSR-PCR引物筛选及反应体系的建立,为利用ISSR标记技术开展槭属树种的系统进化和亲缘关系研究提供一个强有力的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏金乐	河南农业大学林学园艺学院	96	890	17.0	24.0
2	张冬梅		50	423	13.0	18.0
3	钱又宇		15	325	6.0	15.0
4	魏华丽		2	28	2.0	2.0