GJB6在hela细胞的互作蛋白的研究

• 作者: 冯永 夏昆 梅凌云 贺定华 贺楚峰
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: GJB6 互作蛋白 GST-pull down hela细胞
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 91-95
• 页数: 5页
• 分类号: R764.43
• 字数: 3507字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-1520.2008.02.003

摘要

目的 为探讨GJB6的组装、运输、膜定位及间隙连接通道形成的可能机制,在hela细胞筛选GJB6的C-端功能域的互作蛋白.方法 以正常人DNA为模板,PCR扩增GJB6(CX30)的211～261氨基酸编码区,即C-端功能域,构建pGEX-4T-2-GJB6(211～261)-GST原核融合表达载体,纯化融合蛋白和GST蛋白,以纯化的融合蛋白和GST蛋白分别与hela细胞的裂解蛋白进行孵育以沉降(pull down)互作蛋白,SDS-PAGE分离互作蛋白.结果 构建了pGEX-4T-2-GJB6(211～261)-GST原核融合表达载体,纯化了融合蛋白及GST蛋白,但在对沉降所得蛋白进行SDS-PAGE分离、检测及比较,未发现明显差异蛋白条带.结论 本实验虽未能在hela细胞筛选到GJB6的C-端功能域的互作蛋白,但构建了融合表达载体,纯化了融合蛋白及GST,为进一步GJB6的互作蛋白筛选打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺定华	中南大学湘雅医院耳鼻咽喉科	22	110	6.0	10.0
3	冯永	中南大学湘雅医院耳鼻咽喉科	102	545	12.0	16.0
6	夏昆		30	193	8.0	12.0
7	梅凌云	中南大学湘雅医院耳鼻咽喉科	43	225	9.0	13.0
8	贺楚峰	中南大学湘雅医院耳鼻咽喉科	40	202	9.0	12.0