实时定量RT-PCR评价小鼠胸腺功能和状态方法的建立

• 作者: 张华华 郑克勤
• 来源期刊: 江西医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 实时定量RT-PCR 胸腺 胸腺微环境 功能 状态 动物,实验 小鼠
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 4-6,18
• 页数: 4页
• 分类号: R322.5+3
• 字数: 2761字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2294.2008.04.002

摘要

目的 建立实时定量RT-PCR的分析方法,对胸腺微环境内的相关基因的表达进行准确的定性和定量,以分析胸腺微环境及其中细胞的状态,直接有效地评价胸腺功能和状态.方法 提取小鼠胸腺淋巴细胞RNA;逆转录成为cDNA;PCR扩增目的 片段;优化PCR体系;进行实时定量RT-PCR反应,建立扩增曲线;反应结束后,设定阚值,软件输出Ct值;根据比较Ct值法公式,获得不同处理组间相关基因表达比值.结果 实时定量RT-PCR的扩增曲线为S型的动力学曲线,熔解曲线为单一峰,证实反应的准确性和特异性;36周小鼠相对于1周小鼠的胸腺相关基因表达变化比值为:LMO2 2.54±0.08、Foxnl 0.684±0.02、IL±7 0.154±0.03.结论 36周小鼠发生了胸腺衰老,胸腺的功能和状态均出现退化;本研究成功建立利用实时定量RT-PCR评价小鼠胸腺功能和状态方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑克勤	广东医学院医学遗传学研究室	42	166	7.0	11.0
2	张华华	广东医学院医学遗传学研究室	13	45	4.0	6.0