人Delta-like1ext-Fc融合蛋白毕赤酵母表达载体的构建及表达

• 作者: 伍艳兰 何飞 刘利 康志杰 李国辉 梁英民 韩骅 黄斯勇
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 造血干/祖细胞 Notch Delta-like1 融合蛋白 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 450-452,460
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3103字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2008.05.007

摘要

目的:构建人Delta-like1ext-Fc融合蛋白毕赤酵母表达载体PIC-hDll1ext -Fc,并在毕赤酵母GS115中表达.方法:以pEF-BOSneo-hdll1ext-Fc为模板PCR扩增人Delta-like1胞外段.通过DNA重组构建毕赤酵母表达载体PIC-hDll1ext.-Fc.用MD平板筛选重组子,G418筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE、Western blot分析表达蛋白.结果:hDll1基因的胞外段被有效地扩增.序列分析表明,所构建的含hDll1ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,融合蛋白hDll1extFc得到正确表达.结论:成功地扩增了人Delta-likel胞外段,构建了hDll1ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体PIC-hDll1extFc,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究奠定了实验基础.