Bt杀虫蛋白基因cry8Ea2的克隆、表达和活性

• 作者: 刘兴龙 李国勋 李天龙 李长友 程林友
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Bt cry8Ea2基因 基因克隆 蛋白表达 杀虫活性
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 3415字
• 语种: 中文

摘要

根据已知Bt cry8类基因的全长序列设计一对特异性引物JJX5和JJX3,以Bt菌株B-DLL的质粒DNA为模板扩增出3.5 kb大小的片段;将该片段插入大肠杆菌表达载体pET-21b中,并完成了该片段的全序列测定.该基因编码区为3 495 bp,编码的蛋白质由1 164个氨基酸残基组成,相对分子质量为131.8 kDa,等电点为pH 4.71,为弱酸性蛋白.该基因(GenBank:EU047597)编码的氨基酸序列与Cry8Ea1的氨基酸序列同源性高达99.31%,被国际Bt基因命名委员会正式命名为cry8Ea2.经1PTG诱导后该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够正常表达130 kDa的蛋白.表达产物对暗黑鳃金龟.琉璃弧丽金龟和柳蓝叶甲具有活性,在浓度为8.98ug/s时对暗黑鳃金龟、琉璃弧丽金龟一龄幼虫14 d的校正死亡率分别为46.67%和55.56%;在浓度为89.8 ug/mL时对柳蓝叶甲三龄幼虫96 h的校正死亡率为33.33%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘兴龙	河北农业大学河北省农作物病虫害生防工程技术中心	10	53	4.0	7.0
3	李长友	青岛农业大学无脊椎动物细胞培养和细胞工程中心	35	206	10.0	12.0
6	程林友	青岛农业大学无脊椎动物细胞培养和细胞工程中心	1	14	1.0	1.0
7	李天龙	河北农业大学河北省农作物病虫害生防工程技术中心	1	14	1.0	1.0