重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1的抗肿瘤效应及其作用机制

• 作者: 刘刚 姜云波 徐元基 杜芝燕 王妍 贾海泉 陆应麟 陈惠华
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: p53AIP1 肝癌细胞 细胞周期 细胞凋亡 抗瘤效应 基因治疗
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 508-516
• 页数: 8页
• 分类号: R737.5|R730.54
• 字数: 5687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2008.06.002

摘要

目的:探讨外源性p53AIP1(p53-regulated apoptosis-inducing protein 1)基因抗肿瘤效应及其作用机制,以评估p53AIP1基因在肿瘤基因治疗中应用的可行性.方法:构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1,感染人肝癌细胞HepG2,应用MTT比色法、Western blotting、流式细胞术、罗丹明染色以及电镜等观察外源性p53AIP1基因表达对肿瘤细胞的作用及其相关机制.小鼠皮下接种感染Ad-p53AIP1的小鼠乳腺癌4T1细胞,观察Ad-p53AIP1对肿瘤细胞体内成瘤性的影响;建立4T1细胞皮下移植瘤小鼠模型, 直接瘤内多点注射重组腺病毒,观察Ad-p53AIP1的抗肿瘤疗效.结果:感染Ad-p53AIP1的HepG2细胞能够高效表达P53AIP1蛋白.MTT检测显示Ad-p53AIP1对人肝癌细胞HepG2的生长抑制率达50%以上;流式细胞术分析证实p53AIP1使肿瘤细胞周期阻滞于G2/M期;罗丹明染色、电镜观察以及凋亡相关蛋白PARP表达的检测均证实p53AIP1能诱导肿瘤细胞发生明显凋亡.感染Ad-p53AIP1的肿瘤细胞体内成瘤受到非常明显的抑制(P<0.01), Ad-p53AIP1瘤体注射对移植瘤生长也有明显的抑制作用(P<0.05).Western blotting以及RT-PCR检测证实Ad-p53AIP1对p53 mRNA表达无影响,能下调mdm2基因的表达;p53AIP1能上调P53蛋白的表达、下调MDM2蛋白的表达水平,同时还影响P21等细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达.结论:p53AIP1有明显的体内外抗肿瘤作用,其作用机制与其反向调控P53蛋白、调控多种细胞周期和细胞凋亡相关蛋白、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡有关,该基因在肿瘤基因治疗中具有潜在的应用前景.