以MDR1基因启动子为靶点的药物筛选模型的建立

• 作者: 刘建文 李长龙 范忠泽 萨晓婴 许建华 邓皖利
• 来源期刊: 华东理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: MDR1基因 双荧光素酶报告基因 药物筛选
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 650-653,674
• 页数: 5页
• 分类号: R966
• 字数: 3282字
• 语种: 中文

摘要

通过构建以MDR1启动子为启动序列的荧光素酶报告基因载体,建立基于双荧光素酶报告基因系统的多药耐药抑制剂筛选模型.从HCT-8细胞中提取DNA并克隆含有MDR1基因启动子的序列.将该序列重组到荧光素酶报告基因载体pGL-3-Basic的启动区域中,从而构建报告基因载体pGL-MDR1.将 pGL-MDR1和pRL-TK载体共转染到HCT-8 和HCT-8/VCR细胞中,建立用于筛选多药耐药抑制剂的方法.通过调节不同载体的比例来优化转染效率.通过MDR1基因激活剂(热诱导)和抑制剂(EGCG)来验证该方法.通过直接测序法验证了pGL-MDR1含有MDR1基因启动子序列且没有出现碱基突变.在n(pGL-MDR1)∶n(pRL-TK)=5∶5时,转染效率最高并具有最高的荧光素酶活性.通过MDR1基因激活处理后表现为时间依赖性地激活MDR1基因的表达,而MDR1基因抑制剂的作用则相反.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建文	华东理工大学药学院	53	466	12.0	19.0
2	萨晓婴	浙江省医学科学院浙江省实验动物中心	55	345	11.0	15.0
3	范忠泽		84	599	16.0	21.0
4	许建华		59	398	13.0	18.0
5	邓皖利		15	57	3.0	7.0
6	李长龙	华东理工大学药学院	7	125	3.0	7.0