携带人MAGE-1基因重组腺病毒的构建及其在肝癌细胞中的表达

• 作者: 叶菁 师建国 张利军 张惠忠 陈广生
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 黑色素瘤相关抗原 肝细胞癌
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 300-303,307
• 页数: 5页
• 分类号: R73.26|R392
• 字数: 3248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2008.03.013

摘要

目的 构建人黑色素瘤相关抗原-1(MAGE-1)基因的腺病毒,并研究其感染肝癌细胞系HepG2细胞的效率.方法 采用基因克隆技术,将人MAGE-1基因克隆到腺病毒穿梭质粒pShuttle-IRES-hrGFP中,构建pShuttle-MAGE-1-IRES-hrGFP质粒,利用细菌BJ5183将穿梭质粒与pAdEasy-1进行重组,获得重组的腺病毒质粒.线性化的腺病毒质粒经脂质体转染AD293细胞,进行重组腺病毒的包装和扩增.采用CsCl密度梯度离心进行病毒浓缩和纯化.获得的腺病毒感染肝癌细胞HepG2,观察其感染效率和MAGE-1表达水平.结果 通过酶切鉴定证明腺病毒载体构建成功,包装出携带人MAGE-1基因的腺病毒,滴度达2.1×1010pfu/mL,获得的腺病毒对HepG2细胞的感染效率高于98%以上.结论 成功地利用细菌内同源重组方法构建了携带人MAGE-1基因的腺病毒,并能够在肝癌细胞中高效地表达,为利用MAGE-1进行免疫治疗提供了材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	师建国	第四军医大学病理学教研室	62	338	11.0	13.0
2	张利军	第四军医大学病理学教研室	5	25	2.0	5.0
6	陈广生	第四军医大学病理学教研室	46	197	8.0	10.0
7	叶菁	第四军医大学病理学教研室	79	357	10.0	13.0
8	张惠忠	第四军医大学唐都医院检验科	2	5	2.0	2.0