结核分枝杆菌阿拉伯糖基转移酶AftA的原核表达及鉴定

• 作者: 帖儒修 朱道银 李娜 王渝伟 王爽
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 阿拉伯糖基转移酶 aftA基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 400-403
• 页数: 4页
• 分类号: R378.91
• 字数: 2358字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.05.003

摘要

目的 构建高效表达菌株,以大量表达结核分枝杆菌AftA蛋白,为后续的抗结核药物的筛选奠定基础.方法 采用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出AftA的基因片段,将其插入原核表达质粒PQE30,构建重组质粒PQE30-aftA.将PQE30-aftA转化大肠杆菌,用IPTG诱导目的基因表达.Western-blotting免疫印迹法鉴定后纯化该表达产物.结果 经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功构建了重组质粒PQE30-aftA.在大肠杆菌M15中用IPTG诱导表达后,获得了AftA蛋白.蛋白经SDS-PAGE分析约为69.5kD.免疫印迹分析证实目的蛋白与阳性结核病患者抗血清产生特异性反应.结论 成功制备出重组的AftA蛋白,为新型抗结核药物的筛选奠定了物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱道银	重庆医科大学免疫学教研室	113	510	10.0	15.0
2	李娜	重庆医科大学免疫学教研室	63	261	9.0	11.0
3	帖儒修	重庆医科大学免疫学教研室	8	14	2.0	3.0
4	王爽	重庆医科大学免疫学教研室	23	83	5.0	8.0
5	王渝伟	重庆医科大学免疫学教研室	7	17	2.0	3.0