人内皮抑素重组腺病毒的构建及其在人视网膜色素上皮细胞的表达

• 作者: 严密 张军军 张美霞 闫乃红
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 血管生成抑制剂 内皮抑素 视网膜色素上皮细胞 腺病毒 免疫印记
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 245-248
• 页数: 4页
• 分类号: R774.1
• 字数: 4097字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2008.04.002

摘要

目的 观察构建的含人内皮抑素(human endostatn,hES)基因腺病毒载体对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epitheliaum,hRPE)细胞的感染及其基因表达情况,为眼内新生血管性疾病治疗提供一定的实验依据.方法 原代培养hRPE细胞,行角蛋白免疫组织化学进行鉴定.从真核表达载体pEGFP-N1-ASP-hES将ASP-hES扩增,亚克隆至pAdTrack CMV穿梭质粒中,与pAdEasy 1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组为腺病毒载体,线性化后转染293细胞进行包装扩增.用该腺病毒感染hRPE细胞,应用荧光显微镜和Western blot检测病毒感染及外源基因的表达情况.结果 角蛋白免疫组织化学显示所培养的细胞为hRPE细胞,感染24 h后荧光显微镜下可见RPE细胞中有大量的绿色荧光蛋白表达,Western blot结果显示hES蛋白高表达.结论 构建的hES腺病毒对hRPE具有极高的感染效率,可作为一种良好的基因导入载体,为ES基因治疗眼内新生血管性疾病的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张美霞	四川大学华西医院眼科	57	213	7.0	12.0
2	张军军	四川大学华西医院眼科	81	283	9.0	12.0
3	严密	四川大学华西医院眼科	37	285	8.0	15.0
4	闫乃红	四川大学华西医院眼科	21	139	7.0	11.0