苜蓿RAPD引物筛选及条件优化的研究

• 作者: 何庆元 吴丽丽 张晓红 王松华 胡琴
• 来源期刊: 安徽科技学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 苜蓿 RAPD 正交设计 条件优化
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 2524字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8772.2008.02.005

摘要

用SDS法提取了苜蓿基因组DNA的模板.从100个10bp的随机引物中筛选出了12条能在11个苜蓿品种中均能扩增出清晰的片段的引物.应用L16(45)正交表,研究了DNA、dNTPs、Mg2+、Taq酶和引物的浓度对扩增迁移率重现性的影响.用这种方法建立的苜蓿RAPD-PCR优化反应体系为:20μL体系中含DNA模板的浓度是5.0mg/L、dNTPs浓度是0.175mmol/L、Mg2+浓度是1.25mmol/L、Taq酶在20μL的体系中是1.00U、引物浓度是0.401μmol/L.