鸭IFN-α成熟肽基因的原核表达、复性及其抗病毒活性研究

• 作者: 张瑶 杨梅 汪铭书 程安春 钟小容 陈斌 龚永强
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭IFN-α 成熟肽基因 原核表达 色谱复性 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 1753-1758
• 页数: 6页
• 分类号: S852.4
• 字数: 5216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.12.020

摘要

为获得鸭α-干扰素(DuIFN-α)并研究其生物学功能,将DuIFN-α成熟蛋白基因与原核表达载体pET32a+连接后转化到BL21(DE3)获得工程菌BL21(DE3)/pET32a+-DuIFN-α,对其表达产物的纯化和复性关键技术及其抗水疱性口炎病毒(VSV)、鸭瘟强毒(DPV)活性进行研究.结果表明:BL21(DE3)/pET32a+-DuIFN-α经0.4mmol/L IPTG诱导获得高效表达,表达的重组蛋白相对分子质量约37 ku,以包涵体形式存在;重组蛋白经镍金属螯合介质(Ni-MIAC)进行纯化和复性后获得理想效果,其抗VSV活性的比活力达到12 800 U/mg;利用定量PCR检测到15 U/mL的重组DuIFN-α对鸭瘟强毒表现出抑制作用,为重组DuIFN-α的临床应用提供试验数据.